一、本课的重点、难点:
1.实验的基本原理:2,6-D指示剂的双重作用及变色原理;
2.实验中的基本操作:植物组织/细胞破碎方法简介
二、教学目标:
1.掌握维生素C测定的基本原理
2.掌握实验一般操作技巧
3.解释本实验结果,并能够作分析
三、实验主要器材:
简单介绍电位自动滴定仪器;
四、主要教学内容:
1.讲述原理和操作步骤(链接实验指导)(时间20min)
2.示教主要操作步骤
①VC提取:随机取样à秤取3g新鲜茴子白à适当切碎à置于研钵à少许石英砂/~5ml2%草酸à迅速匀浆à转移至50ml容量瓶à2%草酸洗研钵2次,转入容量瓶à振摇2~3次容量瓶à容瓶静置5minà过滤/离心。(时间3min)
②样品测定:取离心液10ml?2à分别置于三角瓶à用2,6-D滴定至桃红色à记录2,6-D用量(ml)。(时间3min)
③空白:取10ml2%草酸?2à用2,6-D滴定至桃红色à记录2,6-D用量à取平均值à计算Vcmg/ml2,6-D。(时间3min)
④2,6D标定:取8ml2%草酸?2à分别准确加入2ml标准Vc溶液à摇匀à用2,6-D滴定至桃红色à记录2,6-D用量à取平均值à计算Vcmg/ml2,6-D。(时间3min)
⑤结果计算:
W(mgVC/100g样品)=[(V-V1)?A/10]?[b/a]?100
A=Vcmg/ml2,6-D;b=样品定容总体积(50ml);a=测定时移取样品液的体积(10ml)
3.学生操作,教师指导(-贯穿全操作过程—记录成绩(时间2h)
几点要求:教师重点一一检查指导以下内容
①研钵里是否有匀浆残留物
②是否以桃红色判定滴定终点
③滴定方法是否正确
4.细胞破碎方法介绍-多媒体课件展示(时间15min)
①化学法
②机械法
5.讨论(时间10min)
教师提问,学生讨论回答。(成绩记录)
①本实验中2,6-D的作用
②2,6-D滴定法测Vc含量方法需注意的问题
五、思考题与课堂讲义e-mail课后发给同学。
1.Vc测定时影响真正含量的因素有哪些?
2.测定Vc始终要在2%草酸条件下进行的原因?
3.除了2,6-D法,Vc测定还有哪些方法?
4.有机溶剂破碎法的原理及常用的有机溶剂?
六、预习实验内容
1..纸层析分离氨基酸。P238
2.电泳技术在分离生物大分子方面的应用。P164、241
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